毛茛為毛茛科毛茛屬多年生草本植物。近年來從毛茛中分離出一系列以白頭翁素為代表的內酯化合物,并證實了其獨特的抗菌消炎、抗病毒、抗癌和增強免疫功能的作用。為了控制毛茛的質量,本文上海昌吉地質儀器有限公司采用高效液相色譜法測定毛茛中白頭翁素的含量,為今后該藥的開發利用提供有效的參考。
1 儀器
Agress1100高效液相色譜儀(大連依利特分析儀器有限公司,包括UV1201紫外-可見檢測器,化學工作站,G1329A標準型自動進樣器) ,METTLERAE240 型電子分析天平(梅特勒-托利多公司,0.1mg);BS-124S 電子天平(德國賽多利斯公司,0.1mg) ;超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司) 。
2討論
2.1 含量測定項指標的選擇 近年來從毛茛中分離出了一系列以原白頭翁素為代表的內酯化合物,并且證實了其具有抗菌、抗病毒和抗癌的藥理作用,而白頭翁素是其主要的活性成分。毛茛在全國大部分省份有分布,由于受氣候、環境等條件的影響,其質量有較大的差別,因此有必要測定其活性成分的含量,為其今后進行大規模的產業開發作準備,也為臨床合理用藥提供參考。
2.2 提取方法的優化 因白頭翁素微溶于冷水,溶于熱水、三氯甲烷、熱乙醇、二氯甲烷等溶劑分子量小,因此我們參照相關文獻并進行考察,結果發現75%的乙醇、100%的甲醇、水均能有效提取白頭翁素,但用水提雜質過多,而乙醇價格遠低于甲醇,因此選取75%的乙醇。采用75%的乙醇超聲萃取30min時幾乎能達到最大萃取,因此選用75%的乙醇超聲萃取30min。
2.3 流動相的選擇 通過文獻查閱,白頭翁素的含量測定色譜條件有以甲醇-水(27:73)為流動相,也有乙腈-0.1%磷酸(15∶85)、乙腈-0.1%磷酸(20:80)、甲醇-0.05mol /L磷酸二氫鈉(30:70)。經試驗,本文采用流動相為甲醇-水(30∶70) 為流動相,避免采用無機鹽溶液,在獲得良好分離效果的同時又可以避免無機鹽溶液對色譜柱的損害。
2.4 流速的選擇流動相流速考察了1.0ml/min和0.8ml/min,流速為1.0ml/min的條件下,基線不穩定,將流速降到0.8ml/min基線限趨于平穩,使白頭翁素得到良好的分離,故確定流速為0.8ml/min。
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